Assassins Creed II ist der Nachfolger des Titels, der als schnellst verkaufte neue Marke in die Videospiel-Geschichte einging. Der mit Spannung erwartete Nachfolger präsentiert einen neuen Helden namens Ezio Auditore da Firenze, einen jungen italienischen Adligen, und eine neue Ära - die italienische Renaissance, mit all ihren kulturellen Errungenschaften und dunklen Seiten.
Assassins Creed II erzählt eine epische Geschichte über Familie, Rache und Verschwörung. Schauplatz ist das Italien der Renaissance, eine Epoche, die Meilensteine der Kunst hervorbrachte, aber auch Schattenseiten voller Korruption und Habgier beinhaltete. Ezio freundet sich mit Leonardo da Vinci an, bekommt es mit den mächtigsten Familien in Florenz zu tun und wandelt durch die Kanäle Venedigs, wo er alles lernt, um ein Meister-Assassinen zu werden.
Der Spieler wird Missionen ausführen können, wann er will und wie er will. Die offene Welt bringt das freie Fortbewegen des ersten Teils zurück und fügt neue Elemente wie Schwimmen und sogar Fliegen hinzu. Die neuen Spielmöglichkeiten sorgen dafür, dass der Spieler das Spiel so durchspielen kann, wie er es möchte. Fähigkeiten müssen perfektioniert werden, um ein Meister-Assassine zu werden, neue Waffen nutzen zu können, Feinde zu entwaffnen und Waffen gegen diese einzusetzen oder Feinde mit versteckten Klingen zu überwältigen.